1、總述
酶聯(lián)免疫吸附測定法
1971年瑞典學者Engvail和Perlmann,荷蘭學者Van
Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (enzyme-linked
immunosorbent assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領域中的前沿課題
，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques )
的基礎上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù) 。
2、基本原理
它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。
在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑） ②酶標記的抗原或抗體（標記物）③酶作用的底物（顯色劑）
測量時，抗原（抗體）先結(jié)合在固相載體上，但仍保留其免疫活性，然后加一種抗體（抗原）與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物（標記物），此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性，當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原（抗體）反應結(jié)合后，再加上酶的相應底物，即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。
其所生成的顏色深淺與欲測的抗原（抗體）含量成正比。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計（酶標儀）加以測定。其方法簡單，方便訊速，特異性強。
3、分類
該法由種類和變化可分為以下幾種：
（一）雙抗體夾心法
?。ǘ╅g接法
（三）競爭法
?。ㄋ模╇p位點一步法
?。ㄎ澹┎东@法測IgM抗體
?。糜H和素和生物素的ELISA
4、特點
該法相較其他方法而言，有幾大特點：
靈敏性高
該測定法的靈敏度來自作為報告集團的酶。眾所周知,
酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現(xiàn)了在細胞或亞細胞
水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。
特異性強
其特異性來自抗體或抗原的選擇性?？乖贵w的結(jié)合實質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點之間。由于兩者在化學結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補關(guān)系，所以抗原抗體反應具有高度的特異性。
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