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iCell 0.25%胰蛋白酶（含0.02%EDTA）

產(chǎn)品說明

在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞外基質(zhì)）水解，使組織或貼壁細(xì)胞分散成單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進一步的實驗。

iCell生產(chǎn)的胰蛋白酶消化液(Trypsin Solution)含0.25%胰酶，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全、細(xì)胞狀態(tài)好等特點。通常室溫消化2分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。

使用方法

1. 貼壁細(xì)胞的消化

a) 吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

b) 加入少量胰蛋白酶消化液，蓋過細(xì)胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同，對于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時間。

c) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落，輕敲幾下可以下來為準(zhǔn)，嚴(yán)禁消化到細(xì)胞完全漂浮，此時吸除消化液。加入含10%血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000RPM條件下離心3-5min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。

2. 組織的消化

不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。